產(chǎn)品名稱：Cygnus HCP畢赤酵母菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F140

產(chǎn)品規(guī)格：1 KIT

產(chǎn)品品牌：Cygnus

產(chǎn)品簡介：

畢赤酵母基因表達系統(tǒng)經(jīng)過十多年發(fā)展，成為較完善的外源基因酵母表達系統(tǒng)，具有易于高密度酵母發(fā)酵，欲表達基因可以穩(wěn)定整合在宿主酵母基 因組中，能使產(chǎn)物有效分泌并適當糖基化，培養(yǎng)方便經(jīng)濟等特點。Pichia pastoris畢赤酵母基因表達系統(tǒng)利用強效可調控啟動子AOX1，已高效表達了HBsAg、TNF、EGF、破傷風毒素C片段、基因工程抗體等多種外 源基因，證實Pichia pastoris畢赤酵母表達系統(tǒng)為高效、實用、簡便 ，以提高表達量并保持產(chǎn)物生物學活性為突出特征的外源基因表達系統(tǒng)，而且非常適宜擴大為工業(yè)規(guī)模Pichia pastoris畢赤酵母發(fā)酵。

檢測原理：

Pichia pastoris HCPs檢測是一個雙位點酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的Pichia pastoris HCPs蛋白與標記有抗- Pichia pastoris抗體的辣根過氧化物酶同時反應，反應發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗- Pichia pastoris蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反構成為夾層式結構：固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應結束后清洗微量滴定板去除未結合反應物。添加 TMB作用底物反應。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度，水解物濃度與Pichia pastoris HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計算出Pichia pastoris HCPs蛋白含量。

檢測過程：

標準檢測：取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25μl標準液，對照物和樣品至待測孔→移取100μl anti- Pichia pastoris:HRP(#F141)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育3小時（快速檢測時溫育1小時），180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數(shù)

結果分析：

標準液(0, 1, 4, 20, 75, 250ng/mL)可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標注吸光值，X軸標注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標準液都要重復滴定到兩個小孔中，以便計算平均分光光度值，樣品也需計算平均吸光值）。

產(chǎn)品用途：

用于檢測在畢赤酵母表達系統(tǒng)中重組表達的產(chǎn)物宿主細胞蛋白污染。*檢測濃度<0.3ng/mL。

相關訂購信息：

品牌        貨號          名稱

Cygnus F500  Vero Cell HCP ELISA Kit Vero細胞宿主蛋白殘留檢測試劑盒

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產(chǎn)品名稱：Cygnus HCP畢赤酵母菌宿主蛋白ELISA試劑盒

產(chǎn)品貨號：F140

關于公司：

Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質量的殘留物，諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品。共有39種Elisa 檢測試劑盒，包括原核、真核表達細胞宿主蛋白檢測試劑盒，細胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等

Cygnus公司產(chǎn)品涵蓋了E.Coli大腸桿菌宿主蛋白殘留、CHO細胞宿主蛋白殘留、HEK293細胞宿主蛋白殘留、Vero細胞宿主蛋白殘留以及細胞培養(yǎng)添加物如BSA殘留、Protein A殘留、insulin胰島素殘留等的檢測試劑盒。